内容标题7

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            1. <dl id='VcYaun'></dl>
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                绍兴帲һ뵽Է创烿ȴԼ生物科技有限公司www.cy-bio.com To order:0575-82578768
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                【特别推荐】²髓过氧化物酶(MPO)测定试剂(单通道)用说明、性能指标  
                发布者:idrfz.chen   
                 

                (本试剂仅用于科研、实验、技术支持Ѽ不直接应用于临崲诊断?/span>

                【ɽ介?/span>

                用于全自动生化分析ȴ쿡ݸ͸Ҷˮ׹ػ单通道注测定血清或血浆样品中髓过氧化物酶?/span>MPO)۰Ͼͺ˸֮Ϛ活֮Զŵ,也可以通过试剂重组用双通道法测ô?/span>MPO活性?/span>

                MPO的结构髓过氧化物?/span>(MPO)是由中性粒细胞、单核细胞和某些组织的巨噬细胞分泌的含血红素辅基的血红素蛋白酨K,在多形核中性粒细胞和单核细胞中的嗜天青颗粒中大量表达并储存,在炎症反·时分泌?/span>MPO升高是心血管系统炎症的指标Ҳûй之一,而且可能是动脉样硬化和冠状动脉疾Ƶꗅ的危险指标?/span>

                【z定方法?/span>

                连续监测?/span>

                【浫ܿܲûô򵥵定原理?/span>

                MPO的检测通过2步反ٷϻ实现?/span>

                第一步,样本中总过氧化物酶?/span>TR)塩化试剂中的底物分解并?/span>4-AA?/span> 色源反应,检测反ղɳȥ应速率ΔA1?/span>

                第二步,用特异性抑制剂抑制佦Ρ样本中髓过氧化物酶活性,剩余的非髓过ֻ氧化物酶催(NR)化Ȼ͹۹Դ剂中的底物分解并与4-AA?/span> 色源反应,检测反ӳ应速率ΔA2?/span>

                将总过氧化物酶活性(TR)减去非髓过氧化物酶活性(NR)得到品中髓过氧化物酶?/span>MPO)活性,其活性与?/span>ΔA1-ΔA2)成正比?/span>

                【ǽ毕剂盒组成?/span>

                 

                ?/span>    ?/span>

                ?/span>    ?/span>

                ?/span>    ?/span>

                MPO试剂Ⅰ(MPO R1?/span>

                 

                GOOD’S缓冲液,4-AAP

                适量

                MPO试剂Ⅱ(MPO R2?/span>

                 

                底ɉ液,色源

                适量

                MPO试剂III?/span>MPO R3?/span>

                 

                MPO抑制?/span>

                适量

                MPO校准?/span>

                冻干1ml

                髓过氧化物酶、稳定剂

                见标?/span>

                MPO质控?/span>

                冻干1ml

                髓过氧化物酶、稳定剂

                见标?/span>

                【样本要求?/span>

                样ǸηȨ为新鲜无溶血的血清或肝素锂抗凝血浆,样本丨|?/span>MPO活性在2-8 °C条件保存˦˦ֻ可稳?/span>2-5天?/span>

                【测定步骤?/span>

                一、单通道u操作

                1.本试剂为液体三试剂,可直接使用?/span>

                2.测定参数:主/副波长:505/660nm;光径ֵ͸Լ10mm;温度:37?/span>?/span>

                3.测定方法?/span>

                加入?/span>

                校准?

                校准?

                测定?/span>

                MPO R1

                140

                140

                140

                校准?(μL)

                25

                -

                -

                校准?(μL)

                -

                25

                -

                样本(μL)

                -

                -

                25

                混匀,置37?/span>孵育1.5分钟

                MPO R2

                60

                60

                60

                混匀,置37?/span>孵育1.5分钟后L取各管吸光Ǻ,每?/span>1分钟?/span>1次,共读2分馷,计算平均每分ǒ吸光度变ȴƻ化率ΔA1/min

                MPO R3

                46

                46

                46

                混匀,置37?/span>孵育3分钟后读取各管吸光度òҪȥ,每?/span>1分钟?/span>1次,共读2分钟,计算平均每分钟吸光度变化率ΔA2/min,计算差值(DA1/min - DA2/min?/span>

                4.上机参ۺ앰?/span>

                ?/span>  ?/span>

                37?/span>

                MPO R3

                46μL

                样本?/span>

                25μL

                ?/span> ?/span> ?/span>

                505nm

                MPO R1

                140μL

                ?/span> ?/span> ?/span>

                660nm

                MPO R2

                60μL

                ?/span>    ?/span>

                速率?/span>

                 

                 

                 

                 

                5.计算?/span>

                髓过氧化物酶活性(U/L?/span> =?/span>ΔA1/min ?/span>ΔA2/min?sub>样本/?/span>ΔA1/min ?/span>ΔA2/min?sub>标准 × ?/span>准管MPO活?/span>

                二、双通道操作

                1、工作液配制?/span>

                总过氧化物酶试剂Ⅰ(TR1): ?/span>MPO R1 ,无需配制?/span>

                非髓过氧化物酶试剂Ⅰ?/span>NR1):将等量的 MPO R1 ?/span> MPO R3 混合F،得?/span> NR1?/span>

                试剂Ⅱ(R2):?/span> MPO R2

                2、测Լ定参数、测定方法、上机参数、计?/span> 参见髓过氧化物酶?/span>MPO)测定试剂(双通道)使ڵڶû˵说明?/span>

                【性能指标?/span>

                1?/span> 空白吸光e?/span> ?/span> 0.100?/span>

                2?/span> 线性范?/span>0-130 U/L ?/span>0-1300 ng/mL),r?/span>0.990?/span>

                3?/span> 批内/分内精密度  CV?/span>6%;批间相对极差 ?/span>8%;

                4?/span> 准确?/span>  相对偏差不超և?/span>10%?/span>

                5?/span> 抗干扰?/span>  抗坏血?/span>?.2mmol/L?/span>TG ?1000 mg/dl?/span>TBil ?0 mg/dl对本法测定无干扰?/span>

                6、本试剂盒检测方法与֪ǧҶ֪һʲô某进口试剂进行相关性比较试验,结果如下?/span>Y=0.998X+0.22?/span>r=0.998?/span>n=50?/span>Y为本法测Ҫһ定结果,X为进口试剂测家ڼи˾ȻǸŮ˚结果?/span>

                【注愡ơ事项?/span>

                1、试剂变混浊或空白ː光度值>0.100旡,将不能使用,应弃去;

                2、建议各实验室建Ϊʲô自己的正常值范围;

                3〢ف试剂与样本量可根据需要按比例调节?/span>

                4、请勿用嘴直接吸取试剂,遡免接触皮肤、眼睛及粘膜,一旦接触,应即用水冲ŮЦЦ污染部位?/span>

                5、使用配套的校准品校准,校准周期?/span>30天,更换试剂批号时需要重新校准。建议使用正常值和病理值生化质控血清进行室内质控,测定的控制值应在确定的限制ʵ范围内,若控制值失控,实验室应采取适当的纠歡措施?/span>

                6、当标本浓度超过检浴ʱ范围时,应用生理盐氡稀释标本后再进行樋测,标本值为测定值乘以稀释倍数?/span>

                【参考һŤ?/span>?/span>

                ?/span>12.7U/L  ?/span>  ?/span>127ng/mL


                【储存条件与有效期?/span>

                未开封的诡剂?/span>2-8℃避光ٶȿɲ?/span>下可稳定14个月,置37?/span>水ء至少可稳?/span>7天?/span>

                试剂开封后,存放分析仪试割ûж仓?/span>(2-8?的试剂在30天内性质稡定?/span>

                【参考文献?/span>

                1?/span>Nilsson L. et al. (1988) Activation of inflammatory system during cardiopulmonary bypass. Scand. J. Thorac. Cardovasc. Surg. 22: 51-53.

                2?/span>Carlsen K. H. (1997) Markers of airway inflammation in preschool wheezers. Monaldi Arch. Chest Dis. 52(5): 455-460.

                 


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