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                绍兴市创烨生物科技有限公司www.cy-bio.com To order:0575-82578768
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                可见紫外分光光度计检测系?/font>
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                全自动生化分析仪检测系?/font>
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                  校准品、质控品系列
                校准品系ŷֱſڲ֪ʲôʱһγ?/font>
                质控品系?/font>
                体外诊断试剂技术支?/strong>
                  肝功能系?/font>
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                  糖代谢系?/font>
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                  分子生物学试?/font>
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                  科研及诊断用?/font>
                  牛血清、牛血清白蛋白、抗血?/font>
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                【特别推荐】:唾液酸SA)测定试剂使用说明、性能指标  
                发塻者:idrfz.chen   
                 

                 (本试剂仅用于ֲǻħ研、实验、技术支持,不直 接应用于临床诊断?/span>

                【简介?/span>

                用于全自动法测定唾液酸含量?/span>

                唾液酸是细胞膜糖蛨白的重要组成部̧ͷȥ,与生物体的许多生物学功能有关,且与细胞恶变、癌转移、浸润、失去接触性抑制、细胞Բ附性降低صԼ及肿瘤抗原性密利相关。测定血清唾液酸浓度,可作为癌肿诊断辅助性指标和Ϊԭû治ֺ疗效观察指标?/span>

                【y定方法?/span>

                神经氨酸苷酶-NANA醛I酶偶联连续监测法

                【测定原理?/span>

                第一步,样本中的结合型唾液酸经神经氨酸苷酶作ൻĻǵشﲩ用后转变?/span>N-乙酰神Ρ氨酸;第二步?/span>N-乙酰神经氨酸?/span>NANA醛缩ɻŶ作用下生存丙酮酸,生成的丙酮酸在乳酸ℱ氢酶的用下?/span>NADH脱氢氧化nj监?/span>340nm处光度的变化速率,与标准比较后可对样本中的唾液酸进行定量?/span>

                【试剂盒组成〡?/span>

                 

                ?/span>    ?/span>

                ?/span>    ?/span>

                ?/span>    ?/span>

                试剂

                涡̲体双试?/span>

                试剂I: 试剂II=3:1

                Tris-HCl缓冲涷ԸȺDz?/span>神经氨酸苷酶?/span>NANA醛缩酨、乳酸脱㹻ܵ氢酶?/span>NADH

                适量

                SA校准?/span>

                液体1ml

                唾液?/span>、稳定剂

                见标?/span>

                SA质控?/span>

                冻干1ml

                唾液?/span>、稳定剂

                见标?/span>

                【样本要求?/span>

                新鲜血清标本。样本采集后,应尽快Ҳ߳˷分离血清。样本置?/span>2~8℃可稨u定7天,冰冻避光保存稳定6个月?/span>

                【测宷Աƨﶪ步骤?/span>

                1.本试剂为液体双试剂,可直接使用?/span>

                2.测定参ϵ:波长:340nm;光径:10mm;温度:37?/span>?/span>

                3.测定方法A?/span>

                加入?/span>

                测定管(U?/span>

                标准管(S?/span>

                空白管(B?/span>

                R1 (?/span>l?/span>

                180

                180

                180

                标本  (?/span>l?/span>

                6

                -

                -

                标准液(μl?/span>

                -

                6

                -

                蒸馏水(μl?/span>

                -

                -

                6

                ͷ匀,置K37?/span>孵育3~5分钟,读取各管吸光度A1

                R2(?/span>l?/span>

                60

                60

                60

                混匀,置37℃延?/span>90秒后监测Ҳûڰ90Ů内各管吸光度变化Ƽ计算每分钟吸光度变化率?/span>A/min

                4.上机参渴dz数?/span>

                ?/span>  ?/span>

                37?/span>

                血?/span>+R1反应旨间

                180~300?/span>

                样本?/span>

                6uL

                ?/span> ?/span> ?/span>

                340nm

                试剂?/span>

                180uL

                ?/span> ?/span> ?/span>

                405nm

                试剂?/span>

                60uL

                血?/span>+R1+R2反应时间

                180?/span>

                5.计算?/span>

                 

                SA?/span>mg/dL(ΔAU/min –ΔAB/min?(ΔAS/min –ΔAB/min?/span>×?/span>准管浓度

                 

                【性能指标?/span>

                1?/span> 空吸光?/span>A?/span>1.000?/span> 空白吸光度变化速率?/span>0.030?/span>

                2?/span> 线性范?/span> 0-200 mg/dL?/span>

                3?/span> 批内/分析ӡ内精密度  CV?/span>5%;批间相对极差 ?/span>7%;

                4?/span> 准确?/span>  相对偏޷不超过?/span>10%?/span>

                5?/span> 抗뿪ҹܻᲽδȥ扰?/span>  血?/span>TG<8.0mmol/L、抗坏血?/span><120mg/dL、胆红素<60mg/dL、血红蛋?/span><60mg/dL对测定结果没有影响?/span>

                6?/span> 方法对照  用本测定试剂和某进口试剂同时测定100例血清样本中SA含量,结果显示相兡系?/span>r = 0.998?/span>

                【注意˵꺋项?/span>

                1、试剂Џ混浊或空白吸光度?/span><1.000时,将不能使用,Ҳѹ֔弃去;

                2、建议各审ơ验室建һͨ绰ʹ自己的正常值范围;

                3、ﯕ剂与样本量可根据需要按比例调节?/span>

                4、请勿用嘴Λ接吸取试剂,避免接触皮肤、眼睛及粘膜A一旦接触,应即用水冲洗污染部位?/span>

                5、使用配套校准品校准˵ڶԿ校准周期?/span>30天,更换详剂批号时需要重新ࠡ准。建议使用正常值和病理ʱ뵽ԼѾܾûʹǰǹ值生化质控血清进行室内质控,测定的控制值应在确定的限制范围内,若控制值失控,实验室应采取适当的纠正措施?/span>

                【参考范囡?/span>?/span>

                血?/span> 46.9-76.3 mg/dL

                建议ɫ߄实验室建立自己的正常参}考值范围?/span>

                【储存条件与有效期?/span>

                未开封的试剂?/span>2-8℃避光条?/span>下可稡定14个月,置37℃水浴至少ǰ稳定7天?/span>

                试剂开封后,存放在ձ分析仪试剦ء仓?/span>(2-8?/span>)的试剂在30天内性质稷йֵó定?/span>

                【参考文献?/span>

                1. Crook M. The determination of plasma or serum sialic acid. Clin Biochem. 1993; 26(1):31-38.

                2. Igor A. Sobenin, et al. Optimization of the assay for sialic acid determination in low density lipoprotein. Journal of Lipid Research. 1998 (39): 2293-2295.

                 

                 


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